روش استخراج ماده ژنتیکی(DNA) از طحال و کبد گوسفند
ساعت ۸:٢٢ ‎ب.ظ روز ۱۳۸٩/۱٢/۱۱  کلمات کلیدی: استخراج ، dna ، طحال ، کبد

این فعالیت آزمایشگاهی، به شما نشان می‌دهد که در همه سلول‌های زنده، مولکول DNA وجود دارد. این روش زمان آمداده‌سازی کمی داشته و کافی است که سری به قصابی محل خود بزنید. الکل را نیز می‌توانید با قرار دادن در ظرف یخ، خنک کنید و یا درون یخچال قرار دهید. DNA حاصل از این روش، ناخالص بوده و برای آنالیزهای بعدی حتما بایستی آلودگی‌هایی (Contaminations) چون پروتئین، کربوهیدرات و RNA را حذف نمود. برای این منظور میتوان  بترتیب از آنزیم‌هایی چون: پروناز (Pronase) یا پروتئیناز (proteinase)، آمیلاز (Amylase) و RNAse استفاده کرد.


 

روش کار:

1-          یک قطعه کوچک از طحال (کبد) گوسفند را بریده و درون هاون چینی قرار دهید و آنرا قطعه قطعه کنید.

2-          به کمک دسته هاون، بافت طحال را به مدت 5 دقیقه کاملا له کنید تا بصورت یکدست (هموژن) درآید.

3-          ml10 محلول 9/0% نمک طعام (NaCl) به بافت هموژن اضافه کرده و بمدت min5 با دسته هاون خوب مخلوط کنید.

(این مرحله مهمترین و سخت‌ترین بخش آزمایش است که اعضای هر گروه می‌توانند بصورت نوبتی بافت را کاملا له کنند)

4-          حال به کل مخلوط حاصل ml5/1 محلول مایع ظرفشویی 10% اضافه کنید.

5-          سپس، ml15 از این محلول را درون فالکون ml50 ریخته و به آرامی به آن ml30 الکل اتانول سرد 95% اضافه کنید.

الکل را نبایستی سریع روی محلول خود بریزید، بلکه بایستی به آرامی و از لبه فالکون الکل را روی محلول قبلی خالی کنید.

6-           با استفاده از یک لوله شیشه‌ای تمیز، به آرامی شروع به همزدن مخلوط حاصل کنید تا DNA ظاهر شود. البته ممکن است با افزودن الکل سرد هم، DNA شما خود را نشان دهد.

7-          لوله شیشه‌ای را درون فالکون بچرخانید تا DNA شما دور آن بپیچد. حال می‌تواند DNA را با دست خود احساس کنید. ویژگی‌های DNA خود را شرح دهید.

www.accessexcellence.org :برگرفته از

 

 

جدول مواد و وسایل لازم

مواد:

وسایل:

یک عدد طحال گوسفند

بشر 250 میلی‌لیتری

یک عدد کبد گوسفند

دستمال تنظیف و کش

محلول 10% مایع ظرفشویی

فالکون 50 میلی‌ایتری

محلول 9/0% نمک طعام

هاون و دسته هاون

الکل اتانول سرد 95%

چاقو و میله شیشه‌ای